正确答案: 荧光能量共振转移
D
题目:
荧光定量PCR是最常用于临床的靶核酸扩增技术。
解析:TaqMan探针荧光定量PCR采用荧光能量共振转移的原理,在PCR反应体系中加入荧光基团标记的TaqMan探针,探针的5'端标记荧光报告基团,3'端标记荧光淬灭基团,当两荧光基团距离足够近时,发生荧光能量共振转移,淬灭基团吸收报告基团在激发光作用下的能量,使其发不出荧光。当报告基团一旦与淬灭基团距离变大,就可以发出荧光。通过检测PCR反应过程中的荧光信号,获得实时描述PCR反应过程的动力学曲线,最后通过标准曲线即可对待测标本中的初始模板进行定量分析。
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解析:入射光和微粒的性质均可影响散射光的信号,当入射光源的波长和强度固定时,反应体系中抗原抗体复合物微粒的大小就成为影响检测结果的重要因素。如果微粒直径小于入射光波长的1/10时,由于微粒细小,均匀受到光波作用,因此散射光在各个方向的分布比较均匀,此时的散射称为瑞利散射(Rayleigh scattering);当微粒直径逐渐增大,正向散射光逐渐增强,当微粒直径大于入射波长的1/10或仅略小于入射光波长时,微粒的不同部位受到光线的作用强度不同,散射光分布明显不均匀,其中前向散射光最强而后向散射光最弱,此时的散射称为德拜散射(Debye scatterng);如果微粒直径等于或大于入射光波长,散射光的分布更加不均匀,且向前散射光远远强于向后散射光,此时称为米氏散射(Mie scattering)。所以Rayleigh公式适合于颗粒直径小于入射光波长1/10的溶液,Debye修正公式适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液,Mie修正公式适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液。
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